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sj314520 在 2023-10-17 23:32 回答了问题
脂质体转染法的优缺点有哪些?
sj314520: √优点 操作快速简单;结果可重复;转染效率高;适用于生产瞬时和稳定的蛋白质。√缺点 需进行条件优化(一些细胞系对阳离子脂质体较敏感);有些细胞系不容易转染;培养基中血清的缺失会增加细胞毒性。
sj314520 在 2023-10-17 23:31 回答了问题
电转法的优缺点有哪些?
sj314520: √优点 原理简单;条件优化后可产生重复性的结果;不限制细胞类型和条件;条件优化后可以快速转染大量细胞。√缺点 需要特殊的设备;需要优化电转脉冲和电压参数;对细胞伤害较大;细胞死亡率很高因此需要的细胞量较大。
sj314520 在 2023-10-17 23:29 回答了问题
常用的细胞转染的方法有哪些?
sj314520: 电转法、脂质体转染法、磷酸钙法、病毒转染√电转法 高脉冲的电压破坏细胞膜,在细胞膜表面形成孔道,DNA通过孔道进入细胞。 √脂质体转染法 带正电荷的脂质体靠静电作用和DNA结合形成DNA-脂质体复合物,然后通过细胞的内吞作用进入细胞。√磷酸钙法 能够促进外源DNA和细胞的结合,磷酸钙-DNA复合物能...
sj314520 在 2023-10-17 23:28 回答了问题
CHO-S,CHO-DG44和CHO-K1的优缺点?
sj314520: CHO-K1代谢偏好于抗体形成,CHO-S代谢偏好于生物量形成,CHO-DG44介于之间√文献报道1:CHO-S,和CHO-DG44相比CHO-K1在ActiCHOTMP培养基中表现出了4-6倍的细胞密度和抗体表达量增长,因此在批量培养期间CHO-K1显示出最佳的抗体生产性能,CHO-S最差,细胞存...
sj314520 在 2023-10-17 23:28 回答了问题
表达系统的选择依据是什么?
sj314520: 考虑临床使用剂量,潜在临床需求总量、药效、安全性√目的:表达系统的选择是重组蛋白类药物开发的最重要环节之一。表达系统一经确认,将确认产品开发全过程的起点。选择构建适当的表达体系,需要筛选出能够满足中试研究的、表达量高的工程菌(细胞),而中试工艺又将决定商业化规模的所有关键参数和种子库。√依据:表达系...
sj314520 在 2023-10-17 23:27 回答了问题
筛选压力对细胞生长和产物表达有何影响?
sj314520: 抑制细胞生长,提高蛋白表达稳定性、高浓度筛选压力导致变异√抑制细胞生长 筛选压力能部分抑制细胞的生存能力。√提高蛋白表达稳定性 添加筛选压力能提高蛋白生产率,同时保持蛋白质质量属性和细胞系稳定性。例如:DHFR是催化二氢叶酸还原成四氢叶酸的酶,四氢叶酸是甘氨酸、胸苷一磷酸和嘌呤生物合成所必需的前体。...
sj314520 在 2023-10-17 23:27 回答了问题
从研发到生产过程中所使用的细胞株替换的最佳时间点?
sj314520: 三期临床样品生产前,产品上市变更√III期临床样品生产前 能进III期表明了成药的可能性又增加了一步,此时细胞株和培养工艺可同时替换。√上市后变更 优点是时间更充足、时间、经济压力相对小;缺点是要求更高,工作量更大,绝对成本更大
sj314520 在 2023-10-17 23:26 回答了问题
从研发到生产过程中所使用的细胞株是否可替换?
sj314520: 可以替换,但需进行可比性研究√可比性试验 目的是确认细胞株变更前后制剂在质量、安全性和有效性方面是否具有可比性。√指南 可参考《人用生物制品可比性研究指南》文件。
sj314520 在 2023-10-17 23:26 回答了问题
有哪些厂商可以提供CHO细胞系?
sj314520: ATCC 、ECACC 、Lonza、Merck、Thermo Fisher√ATCC CHO-K1,研发免费,商业提成。√AECACC CHO-K1,研发免费,商业提成或买断。√Lonza CHO-K1 SV/GS KO,研发年费,商业年费+提成。√Merck CHOZN GS,研发年费,商业买断...
sj314520 在 2023-10-17 17:27 发表了文章
不确定度相关的标准汇总▼标准编号标准名称 RB/T 141-2018化学检测领域测量不确定度评定利用质量控制和方法确认数据评定不确定度 RB/T 151-2016食品微生物定量检测...
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