1
关注
955
浏览

常用重组蛋白生产的表达系统有哪些?

您还未登录!暂时最多只可查看 1 条回答

登录! 还没有账号?去注册

kk444555 一阶会员 用户来自于: 广东省深圳市
2023-10-17 23:22

大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、哺乳动物细胞表达系统
大肠杆菌表达系统 大肠杆菌表达系统是目前应用时间最长、最成熟的表达系统,适合于表达非糖基化蛋白质及二级结构较简单的蛋白质,表达产物可在细胞质内形成包涵体,需要经过复性工艺;也可分泌目的蛋白于细胞间质,或在细胞质内可溶性表达,这种情况一般不需要复性。

酵母表达系统 酵母表达系统的特点是表达量高,适合于表达大量蛋白质和部分糖基化蛋白质,达产物一般分泌到胞外,可以直接从培养液中检测目的蛋白,不需要复性。目前毕赤酵母表达系统已经逐渐替代啤酒酵母表达系统。其主要特点为大规模发酵生产方便,比哺乳类细胞表达系统成本低,最显著优点是易于实现高效表达,尤其是多拷贝毕赤酵母表达系统,可在染色体上整合多个目的基因拷贝,表达水平高,典型的例子就是重组人白蛋白的表达体系;缺点是发酵密度高时,酵母的蛋白酶能够降解表达的目的蛋白,引起目的蛋白C端或N端氨基酸降解。

哺乳动物细胞表达系统 哺乳动物细胞表达系统适合表达糖基化蛋白和空间结构较复杂的蛋白质,表达产物一般存在于细胞质中,如果在基因构建时于目的蛋白前加一段信号肽,表达产物会分泌到胞外,通过细胞翻译后包装成为有活性的蛋白质,目前一般采用CMV、EF-1a等强启动子。CHO属于该类表达系统,重组人红细胞生成素即采用这种表达系统。近年来,随着治疗性抗体药物的发展,相应的真核表达体系的研究也有了很大的发展,目的蛋白表达量能达到近10g/L细胞培养液。

关于作者

问题动态

发布时间
2023-10-17 23:22
更新时间
2023-10-17 23:22
关注人数
1 人关注

推荐内容

进口药品再注册,可以同时合并申请变更持证商和生产厂地址吗?
对于没有通过临床试验或以人为对象的生物学等效性试验而获得批准的分制医药品,以什么为标准处方比较好呢?
易于进行工艺放大的细胞株有哪些特征?
实际生产批次和等效性试验中使用的批次的制法相同”,“制法相同”指的是什么范围呢?
行一仿制普通片剂的开发,该片剂原研厂在国内批准进口的有10mg和20mg两种规格,但现在原研厂只有20mg规格产品在国内本,地化生产并销售,10mg规格已不再进口。请问是否可以仿制10mg规格产品?
对于CFDA公布的289基药目录中可豁免或者简化人体生物等效性试验(BE)品种名单(征求意见稿)中提出可以“采用药学一致性评价方法的问题
生物药物的研究的实验室研究阶段需要开展哪些工作
常用的细胞转染的方法有哪些?
变更包装材料/容器生产厂,属于几类变更,需进行哪些研究验证工作?
克隆筛选时加筛选压力对细胞培养有什么影响?