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筛选压力对细胞生长和产物表达有何影响？

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sj314520 一阶会员用户来自于: 广东省深圳市
2023-10-17 23:27

抑制细胞生长，提高蛋白表达稳定性、高浓度筛选压力导致变异
√抑制细胞生长筛选压力能部分抑制细胞的生存能力。

√提高蛋白表达稳定性添加筛选压力能提高蛋白生产率，同时保持蛋白质质量属性和细胞系稳定性。例如：DHFR是催化二氢叶酸还原成四氢叶酸的酶，四氢叶酸是甘氨酸、胸苷一磷酸和嘌呤生物合成所必需的前体。氨甲喋呤（MTX）是叶酸的类似物，可以与DHFR结合并抑制其活性。从而使细胞在缺乏胸苷和嘌呤的培养基中死亡。当细胞在MTX的压力下生长时，只有DHFR基因扩增并高效表达的群体才能存活下来。随着MTX浓度的升高，存活下来的细胞DHFR扩增程度越高。能耐受高浓度MTX压力的细胞，可能含有几千个拷贝的DHFR基因。

√高浓度筛选压力导致变异在极高的筛选压力浓度(如100-1000μM)下逐渐培养细胞，可能导致靶基因变异，并可能对细胞克隆性和稳定性造成风险。

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: 风清飞扬 二阶会员
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发布时间: 2023-10-17 23:27

更新时间: 2023-10-17 23:27

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