1
关注
488
浏览

常用重组蛋白生产的表达系统有哪些?

您还未登录!暂时最多只可查看 1 条回答

登录! 还没有账号?去注册

kk444555 一阶会员 用户来自于: 广东省深圳市
2023-10-17 23:22

大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、哺乳动物细胞表达系统
大肠杆菌表达系统 大肠杆菌表达系统是目前应用时间最长、最成熟的表达系统,适合于表达非糖基化蛋白质及二级结构较简单的蛋白质,表达产物可在细胞质内形成包涵体,需要经过复性工艺;也可分泌目的蛋白于细胞间质,或在细胞质内可溶性表达,这种情况一般不需要复性。

酵母表达系统 酵母表达系统的特点是表达量高,适合于表达大量蛋白质和部分糖基化蛋白质,达产物一般分泌到胞外,可以直接从培养液中检测目的蛋白,不需要复性。目前毕赤酵母表达系统已经逐渐替代啤酒酵母表达系统。其主要特点为大规模发酵生产方便,比哺乳类细胞表达系统成本低,最显著优点是易于实现高效表达,尤其是多拷贝毕赤酵母表达系统,可在染色体上整合多个目的基因拷贝,表达水平高,典型的例子就是重组人白蛋白的表达体系;缺点是发酵密度高时,酵母的蛋白酶能够降解表达的目的蛋白,引起目的蛋白C端或N端氨基酸降解。

哺乳动物细胞表达系统 哺乳动物细胞表达系统适合表达糖基化蛋白和空间结构较复杂的蛋白质,表达产物一般存在于细胞质中,如果在基因构建时于目的蛋白前加一段信号肽,表达产物会分泌到胞外,通过细胞翻译后包装成为有活性的蛋白质,目前一般采用CMV、EF-1a等强启动子。CHO属于该类表达系统,重组人红细胞生成素即采用这种表达系统。近年来,随着治疗性抗体药物的发展,相应的真核表达体系的研究也有了很大的发展,目的蛋白表达量能达到近10g/L细胞培养液。

关于作者

问题动态

发布时间
2023-10-17 23:22
更新时间
2023-10-17 23:22
关注人数
1 人关注

推荐内容

国内除了我们CDE对方案进行审核和批准,国内还有遗传办,遗传办不光是看遗传资源,同时,他们也看方案,有没有这种潜在的联动的机制的可能CDE和科技部?
在稳定性研究中,样品的杂质含量处于鉴定限和界定限范围内,但大于安全批的含量,请问如何处理?
对于上市产品变更直接接触药品包材的稳定性研究,根据指导原则,其中一项:需要提供新包装的3-6个月加速和长期稳定性试验。请问:长期稳定性研究需要做多长时间?也是3-6个月,还是需要做到产品的效期?
生物新药的临床前研究主要包括哪些内容
某仿制药规格为1mg,而原研制剂规格为2mg。比较溶出曲线的相似性时,可否把2mg原研产品作为参比制剂?同理,可以拿不同剂型的原研作为参比吗?
对处方变更前的3个批次制剂进行释放试验,但在年产量非常少的情况下,是否也需要进行3个批次制剂的释放试验?
IND申报时对载体构建有何要求?
关于原料药工艺变更后杂质研究检测方法缺乏针对性具体指的是什么?
获准开展药物临床试验的药物增加与其他药物联合用药的,若该药物已经在境内批准上市,是否需同时提出药物临床试验申请?
对于没有通过临床试验或以人为对象的生物学等效性试验而获得批准的分制医药品,以什么为标准处方比较好呢?