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cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:32 发起了提问 菌种: 问答如何进行干扰回收试验？

哪托来了: 先将保藏的已知菌株传代，次日挑取处于对数生长期的纯菌制备目标菌悬液，起始浊度为0.5McF。稀释104倍备用。用临床标本制备干扰物，例如消化后的痰液、正常粪便混悬液、脓液（过于稠厚的需稀释10倍）等。由于尿液中干扰菌太少，一般不选用尿液做干扰物。取1ml干扰物，加入0.1ml稀释后的目标菌悬液。混匀...; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:30 发起了提问 实验室: 问答临床实验室检测革兰阳性需氧杆菌有何临床意义？

哪托来了: 革兰阳性需氧杆菌的毒力差别很大，有些菌株可引起人类的严重感染（如炭疽杆菌、白喉棒杆菌），有些成员可能是机会致病菌。临床实验室中经常能够分离到革兰阳性需氧杆菌，大多数是由环境或患者皮肤黏膜的长居菌群污染（指标本）而来，因此这一类菌不需要鉴定到种的水平。当从有临床意义的标本中（除了尿以外的其他体液或脓肿...; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:27 发起了提问 实验室: 问答为何CLSI推荐的检测ESBL的确证试验不能用于除大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌以及奇异变形杆菌外肠杆菌科细菌中ESBL的检测？

哪托来了: ESBL确证试验检测的原理是ESBL的活性能被酶抑制剂克拉维酸所抑制，而在除大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌以及奇异变形杆菌外肠杆菌科细菌中，如阴沟肠杆菌、枸橼酸菌属、摩根菌属和沙雷菌属由于能产生不能被酶抑制剂克拉维酸所抑制的染色体AmpC酶以及其他的耐药机制，会干扰ESBL的检测，从而导致E...; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:26 发起了提问 实验室: 问答核酸提取的主要步骤是什么？

哪托来了: 核酸提取的主要步骤包括：①细胞破壁与核酸的释放；②核酸的分离与纯化；③核酸的浓缩、沉淀和洗涤三个主要的步骤。; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:22 发起了提问 实验室: 问答对于细菌或真菌的纯培养物，基因组DNA的粗提的方法主要有哪些？

哪托来了: 基因组DNA的粗提法仅适合于对基因组DNA完整性要求不高的分子生物学实验，如靶基因部分序列的分子检测与鉴定、耐药基因及耐药相关突变的检测等。粗提法提取细菌或真菌的基因组DNA，对于仪器、试验的要求较低，常用的方法主要有：水煮法：即刮取少量菌苔于100μl ddH2O中，100℃煮沸10分...; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:20 发起了提问 实验室: 问答常用于细菌的广范围PCR检测的靶基因有哪些？

哪托来了: 常用于细菌的广范围PCR检测的靶基因主要有16S rRNA基因、rpoB基因、tuf基因、dnaJ基因、dnaK基因、gyrA基因、gyrB基因、recA基因、groEL基因等。 16S rRNA基因的特点，是广范围PCR通常选用16S rRNA基因作为靶基因的主要原因：①16S rRNA基因存在...; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:19 发起了提问 实验室: 问答分子生物学诊断中的假阴性原因有哪些？其最常见的假阴性原因是什么？

哪托来了: 出现假阴性的原因有：①扩增实验受到抑制；②在核酸的提取、处理和保存过程中的不慎造成模板核酸的丢失；③内源性DNA酶及RNA酶对模板核酸的降解；引物设计较差（如引物不在保守区域）；④核酸扩增及分析系统的敏感性不够；⑤反应特异性差；⑥不合适的扩增条件。扩增实验的抑制因素，是分子生物学诊断中的最常见的假...; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:09 发起了提问 实验室: 问答分子生物学诊断中的假阳性原因有哪些？

哪托来了: 分子生物学诊断中出现假阳性的原因有：①扩增前处理中的污染；②试剂、水、培养基中出现外源性靶DNA；③引物特异性差；④不合适的扩增条件；⑤实验员自身污染; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:06 发起了提问 检验测试: 问答如何检测某一类ESBLs？

哪托来了: 每一类ESBLs，可设计一个通用引物进行PCR检测，实际检测时可以参照部分文献中提供的引物，常用的引物见下表。PCR体系：50μl，其中buffer 5μl，dNTP 4μl，引物各0.25μl，聚合酶0.25μl，双蒸水38.25μl，模板2μl。反应条件：94℃ 5分钟，94℃ 45秒，42～5...; 关注问题 2  0  0 评论

cyxwvoarn 在 2021-03-04 23:06 发起了提问 实验室: 问答 ESBLs主要有哪些类型？

哪托来了: ESBLs主要包括：SHV，TEM，CTX-M（及Toho），OXA，PER，VEB，BES等类型。; 关注问题 2  0  0 评论

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