该问题已被锁定!
2
关注
3688
浏览

生物药物的研究的实验室研究阶段需要开展哪些工作

您还未登录!暂时最多只可查看 1 条回答

登录! 还没有账号?去注册

似水流年 二阶会员 用户来自于: 广东省深圳市
2020-03-31 13:26

实验室研究阶段 基因工程药物是生物药物的重要组成部分,研究开发个新的基因工程药物,并把研究成果推向产业化生产,这中间有很多步骤和技术环节。首先选择有药用价值的蛋白质,也称“目的蛋白”,研究该蛋白的结构、功能、性质和作用。

其次,构建具有目的基因的高效表达的工程细胞。目的基因的来源有全合成法、以mRNA为模板的RTFCR法、以eDNA文库为模板的PCR法等。一般大目的基因可从总RNA文库中分离出总mRNA,利用亲和层析分离出目标蛋白的mRNA,并经反转录获得cDNA或从cDNA文库通过PCR扩增所需的eDNA,测eDNA序列以确定为目的DNA;

选择一种合适的宿主细胞系统(细菌、酵母、动物细胞等)和合适的载体;重组(构建)高效表达载体,并转染人宿主细胞;筛选阳性克隆,获得工程细胞或工程菌株,测定该工程细胞或工程菌株的稳定性(传代50 ~ 100代)和载体结构稳定性以及表达产率的稳定性(SDS-PAGE); 符合预定目标后,建立生产种子细胞库,为了保证种子细胞库的稳定性,要建立两级种子库,包括主细胞库和生产细胞库,要保证建细胞库时细胞的均一性。

建立生产细胞库后, 要在实验室规模的条件下,研究细胞培养和发酵最佳方案。初步建立目标蛋白的高效分离、纯化和制剂方案。这两个方案确定后,写出工艺规程。参照有关基因工程药物质量标准,建立目标蛋白质量控制方法和标准。在得到少量的纯目的蛋白后,初步进行药物体内、外疗效试验,基本明确目的蛋白疗效后,再进行以下研究。

关于作者

问题动态

发布时间
2020-03-31 13:26
更新时间
2020-03-31 13:26
关注人数
2 人关注

相关问题

生物学评价亚慢性毒性试验报告常见需注意问题有哪些
取样、分样后的剩余样品如果不做无菌和微生物检测,可否重新放入包装中?
PMMA骨水泥产品的性能研究应至少关注哪些内容?
如果说A药是一个新药,B药是国内已上市药品,但是我们这次做的是B药的一个新适应症,那么,如果联合的话,做完了关键研究,我们必须要申请NDA,我们A药才能获得批准?
医用敷料如何根据其成分和用途进行分类管理?对于含有生物活性成分的医用敷料,如何进行管理分类?
SUSAR快速报告时,可以仍然保持盲态而不明确使用的是试验药物、阳性对照药还是安慰剂吗?是否需要破盲?
微生物限度检查的培养箱是否属于计算机化系统哪个级别,一定要自动记录打印么?
生物安全实验室P1、P2、P3、P4的等级有什么区别
研究资料中的检测报告,如疲劳等动态试验、病毒学试验、免疫学试验等,是否必须由具有相应资质的检测机构出具?
研究方案编号与版本号有何区别?

推荐内容

如验证时的装载方式为半载或满载,在以后生产中处于满载和半载之间的是否需要验证?
为什么可以以释放速率或透过速率的同一性判定为生物学上的一致性呢?为什么新申请的仿制药品不能适用这个判定标准呢?
注射剂的原料药来源变更在省局备案即可,备案资料需要哪些?对于一种原料药的变更,如果多品种、多规格使用时,是否所有相关品种和规格都要进行稳定性考察?
临床试验核查现在并到研制现场核查中了吗?
药品研发实验进行到什么阶段才进行中试呢?
某原料药原工艺为小试,无法进行大生产,现工艺变更,质量对比研究采用研究工作基础较好的上市品作为对照药进行对比研究,如仿制药一样,是否可以?
有一原料药采用进口原料中间体,在国内完成最后一步的合成。据了解,目前FDA要求合成原料药的反应步数至少应为三步;欧盟要求至少有一步化学反应是在申报企业生产。我们这样做是否可行?
参照药的选择和来源?
原料药发生 III 类变更后,对终产品已做全面的结构确证,包括四大光谱等,是否还需与原工艺终产品进行对比研究?
克隆筛选时加筛选压力对细胞培养有什么影响?