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生物药物的研究的实验室研究阶段需要开展哪些工作

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似水流年 二阶会员 用户来自于: 广东省深圳市
2020-03-31 13:26

实验室研究阶段 基因工程药物是生物药物的重要组成部分,研究开发个新的基因工程药物,并把研究成果推向产业化生产,这中间有很多步骤和技术环节。首先选择有药用价值的蛋白质,也称“目的蛋白”,研究该蛋白的结构、功能、性质和作用。

其次,构建具有目的基因的高效表达的工程细胞。目的基因的来源有全合成法、以mRNA为模板的RTFCR法、以eDNA文库为模板的PCR法等。一般大目的基因可从总RNA文库中分离出总mRNA,利用亲和层析分离出目标蛋白的mRNA,并经反转录获得cDNA或从cDNA文库通过PCR扩增所需的eDNA,测eDNA序列以确定为目的DNA;

选择一种合适的宿主细胞系统(细菌、酵母、动物细胞等)和合适的载体;重组(构建)高效表达载体,并转染人宿主细胞;筛选阳性克隆,获得工程细胞或工程菌株,测定该工程细胞或工程菌株的稳定性(传代50 ~ 100代)和载体结构稳定性以及表达产率的稳定性(SDS-PAGE); 符合预定目标后,建立生产种子细胞库,为了保证种子细胞库的稳定性,要建立两级种子库,包括主细胞库和生产细胞库,要保证建细胞库时细胞的均一性。

建立生产细胞库后, 要在实验室规模的条件下,研究细胞培养和发酵最佳方案。初步建立目标蛋白的高效分离、纯化和制剂方案。这两个方案确定后,写出工艺规程。参照有关基因工程药物质量标准,建立目标蛋白质量控制方法和标准。在得到少量的纯目的蛋白后,初步进行药物体内、外疗效试验,基本明确目的蛋白疗效后,再进行以下研究。

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发布时间
2020-03-31 13:26
更新时间
2020-03-31 13:26
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