1 回答
1.测定上限测定上限应使95%的临床标本不经稀释即可进行测定,具体数值必须通过线性范围试验加以确定,因为检测上限是不可超越的界限,当测定值高于上限临界值时,应减少标本用量或将标本稀释后重新测定。
2.测定下限测定下限实测多少就报告多少,如未经验证,随意延长测定下限的做法是不正确的。
3.对测定范围线性的评价通过制作剂量反应曲线的实验可以确定某种测定方法的吸光度-浓度线性范围,就能为制作实际工作中使用的校正曲线打下坚实的基础。随后要对其线性拟合的良好程度和实用性进行实际检查与评价。
(1)对线性范围内的浓度与对应吸光度值作直线回归分析,求出此直线的截距a和斜率b,建立直线回归方程y=a+bx;并作相关分析,求出相关系数(r)。值得强调的是校正曲线是一条直线,回归-相关分析只是一种数据评价手段,不能代替在基本操作上下功夫。
(2)线性回归方程拟合程度的检验:所绘制的回归直线能否代表原资料各观测点的趋势,即各观测点与回归直线的差异是否只是来自随机抽样误差而无真正的差别,通过线性回归方程拟合度检验,即可作出判断。方法仍然是用变异分析,看剩余平方和的大小,如剩余平方和()对总变异()的比值越小,说明Y的实际观测值与Y的估计值()越接近,)来表示。越接近于,表明拟合度越高。曲线拟合越好。这种拟合度,可用相关指数( 这里要注意的是必须由配得的回归方程直接算出的值计算。
(3)使用高浓度和低浓度临床标本若干份进行实际的线性检查,理想的情况是该方法的分析范围的最高浓度上限应能使95%的临床标本不经稀释均能得到正确的测定结果。