01 有限稀释法是传统的挑选单克隆的方法，该方法操作简单，对仪器设备的需求比较少，并且方便与成像系统关联使用，因此是目前应用较多的单克隆挑选方法；其缺点是效率比较低，需要在大量的96/384孔板中进行挑选才有可能获得理想的克隆(一般认为在不低于1000个克隆中挑选)。有限稀释法对人工依赖比较高，不同操作人员的操作习惯差异会影响实验结果，并且不同公司或硏究机构在细胞株、单克隆培养基等方面存在的差异同样会带来实验结果的差异，因此计划使用该方法的科研机构或公司，需要建立自己的平台方法，同时使用固定的操作人员来减少误差，如果条件允许可以使用设备对工程细胞进行有限稀释的操作。
02 有限稀释法很难给出一个通用的单克隆形成率，但是可以肯定的是在不借助成像设备的情况下，只做1轮有限稀释很难确定所选细胞是单克隆。如果想获得高的单克隆率，一般认为至少需要2轮以上有限稀释，稀释比率在0.3-0.8/孔。对于有限稀释法来说，不同生物公司或硏究机构在细胞株和单克隆培养基等方面存在差异，这些差异直接影响了单克隆成活率(有多少单细胞能长成群落)，加上细胞之间可能存在的相互作用(如趋向于结团等)，显然单纯使用泊松分布计算单克隆概率是不够的。笔者认为对于不同实验室来说，具体需要做几轮有限稀释和使用多大的稀释比例需要根据该实验室具体情况通过实验来确定。
