1
关注
1169
浏览

常用重组蛋白生产的表达系统有哪些?

查看全部 1 个回答

kk444555 一阶会员 用户来自于: 广东省深圳市
2023-10-17 23:22

大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、哺乳动物细胞表达系统
大肠杆菌表达系统 大肠杆菌表达系统是目前应用时间最长、最成熟的表达系统,适合于表达非糖基化蛋白质及二级结构较简单的蛋白质,表达产物可在细胞质内形成包涵体,需要经过复性工艺;也可分泌目的蛋白于细胞间质,或在细胞质内可溶性表达,这种情况一般不需要复性。

酵母表达系统 酵母表达系统的特点是表达量高,适合于表达大量蛋白质和部分糖基化蛋白质,达产物一般分泌到胞外,可以直接从培养液中检测目的蛋白,不需要复性。目前毕赤酵母表达系统已经逐渐替代啤酒酵母表达系统。其主要特点为大规模发酵生产方便,比哺乳类细胞表达系统成本低,最显著优点是易于实现高效表达,尤其是多拷贝毕赤酵母表达系统,可在染色体上整合多个目的基因拷贝,表达水平高,典型的例子就是重组人白蛋白的表达体系;缺点是发酵密度高时,酵母的蛋白酶能够降解表达的目的蛋白,引起目的蛋白C端或N端氨基酸降解。

哺乳动物细胞表达系统 哺乳动物细胞表达系统适合表达糖基化蛋白和空间结构较复杂的蛋白质,表达产物一般存在于细胞质中,如果在基因构建时于目的蛋白前加一段信号肽,表达产物会分泌到胞外,通过细胞翻译后包装成为有活性的蛋白质,目前一般采用CMV、EF-1a等强启动子。CHO属于该类表达系统,重组人红细胞生成素即采用这种表达系统。近年来,随着治疗性抗体药物的发展,相应的真核表达体系的研究也有了很大的发展,目的蛋白表达量能达到近10g/L细胞培养液。

关于作者

问题动态

发布时间
2023-10-17 23:22
更新时间
2023-10-17 23:22
关注人数
1 人关注

推荐内容

联合用药的单臂在一定条件下是可以接受的,什么条件下两个Norm加Norm的联合用药可以用单臂?
关于原料药工艺变更后杂质研究检测方法缺乏针对性具体指的是什么?
干混悬剂、栓剂(直肠栓和阴道栓)处方变更前后是否也需要进行溶出行为对比研究?
化学新药进入了关键临床阶段,关键临床原料药的起始物料和中间体的分析方法,是否需要一个全面的验证?
我公司有无菌分装的生产线,按GMP要求进行设备验证,环境监测、培养基模拟灌装试验,请问申报新的无菌分装品种时是否可以借鉴已有的验证资料?是否需要单独为申报新品种再做上述验证工作?
原料药稳定性测定粒径的意义?
我公司现开发一种口服固体制剂,经对原研制剂的处方进行研究分析,确定其处方中使用了一种抗氧剂,但在国内无法购买到有合法来源有药用批准文号的该抗氧剂,请问可以使用食品级标准吗?
如果一速释原研药在15分钟的溶出率达85%以上,仿制制剂的15分钟溶出率是否也一定要在85%以上,然后才能以相似因子比较相似性。
国内除了我们CDE对方案进行审核和批准,国内还有遗传办,遗传办不光是看遗传资源,同时,他们也看方案,有没有这种潜在的联动的机制的可能CDE和科技部?
质量研究用对照品需提供哪些技术资料?